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紫外可見分光光度法的定量分析基礎說明

點擊次數:5426  更新時間:2020-08-30
紫外可見分光光度計是基于紫外可見分光光度法原理,利用物質分子對紫外可見光譜區的輻射吸收來進行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。
 
紫外可見分光光度法的定量分析基礎是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質在一定濃度的吸光度與它的吸收介質的厚度呈正比,其數學表示式如下:
 A=錬c
式中:A—吸光度(又稱光密度、消光值),
å—摩爾吸光系數(其物理意義為:當吸光物質濃度為1摩爾/升,吸收池厚為1厘米,以一定波長原光通過時,所引起的吸光值A),b—吸收介質的厚度(厘米),c—吸光物質的 濃度(摩爾/升)。
物質的顏色和它的電子結構有密切的關系,當輻射(光子)引起電子躍遷使分子(或離子)從基 態上升到激發態時,分子(或離子)就會在可見區或紫外呈現吸光,顏色的發生或變化是和分 子的正常電子結構的變形聯系的。當分子中含有一個或更多的生色基因(即具有不飽和鍵的 原子基團),輻射就會引起分子中電子能量的改變。常見的生色團有:
CO, -N=N-, -N=O,-C N,CS
如果兩個生色團之間隔一個碳原子,則形成共軛基團,會使吸收帶移向較長的波長處(即紅 移),且吸收帶的強度顯著增加。當分子中含有助色基團(有未共用電子對的基團)時,也會 產生紅移效應。常見的助色基團有:-OH -NH2, -SH, -Cl, -Br, -I
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